高效液相色譜儀器的組成
儀器由LC-20AD高壓雙泵、SPD-20A紫外檢測器、RID-20A示差檢測器、CTO-20A柱溫箱、手動進樣器、電腦軟件系統組成。
操作前的準備工作
流動相的制備:根據供試品分析方法要求,配制足量的流動相,經過0.22μm濾膜(水系膜或有機膜)濾過,使用前超聲、脫氣。
儀器的操作方法
1.開啟電腦,先點擊桌面“LabSolutions”圖標,登錄液相工作站,進入儀器操作頁面,接著調出要用的分析方法,檢查各參數的設置。
2.旋開所使用泵上的排氣閥,按下“Purge”鍵,屏幕顯示Purging,自動排氣5min,完成后把排氣閥關閉;
3.在工作站中打開泵。(一般剛開始時流速要比較低,然后慢慢升高,如一開始總流速為0.2ml/min,接著總流速為0.4ml/min,接著總流速為0.6ml/min,過幾分鐘后改為需要的流速)
關于數據采集的方法
(1)在儀器操作界面,點擊左邊“數據采集”目錄下的“儀器參數顯示/隱藏”項。
(2)分析參數設定
a.在“常規儀器參數視圖”中,有“簡單設置”和“時間程序”2項。
b.先在“簡單設置”項下根據分析方法選擇“等度洗脫”還是“梯度洗脫”,填上流速(比例),根據需要選定波長范圍,確定需要打開的光源,柱溫箱溫度,方法運行時間。
(3)全部設置完成后,點擊窗口左上角“文件”中的“方法另存為”,將設置好的方法起好項目名存到的文件夾中。
(4)等儀器就緒,基線平穩,進樣。
進樣參數的設置
(1)在左邊數據采集目錄下,點擊“單次運行”,跳出樣品信息登記窗口。
(2)輸入樣品的品名、批號、日期、進樣量,保存路徑等。
(3)用微量進樣針取定量樣品,在load狀態下進行進樣,然后將進樣撥桿旋到inject狀態,然后拔出微量進樣針,儀器開始運行方法并記錄數據。
(4)進樣完成后清洗進樣針。
數據處理操作步驟
(1)點擊左邊“數據采集”目錄下的“數據處理”項,到數據處理界面。
(2)在左邊“文件夾”下選擇目標數據保存文件夾,調出要分析的數據文件色譜圖,根據空白圖譜和基線情況,進行數據處理。
(3)圖譜處理完成后,點擊左邊“數據處理”目錄下的“數據報告”項,設置好報告參數(面積百分比,分離度,理論塔板數等),點擊左邊“數據報告”目錄下的“打印”項,打成pdf文件。
關機操作
(1)關機前,用規定好的溶劑清洗保存色譜柱和儀器通道,調用編輯好的關機方法,以降低流速,關閉檢測器光源。
(2)退出分析工作站及其他窗口,關閉計算機。
(3)關掉儀器電源開關。
(4)登記儀器使用記錄。
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