手性色譜柱是由具有光學活性的單體,固定在硅膠或其它聚合物上制成手性固定相。通過引入手性環(huán)境使對映異構體間呈現(xiàn)物理特征的差異,從而達到光學異構體拆分的目的。手性分離效果是多種相互作用共同作用的結果。這些相互作用通過影響包埋復合物的形成,特殊位點與分析物的鍵合等而改變手性分離結果。由于這種作用力較微弱,因此需要仔細調(diào)節(jié)、優(yōu)化流動相和溫度以達到分離效果。由于存放、運輸?shù)冗^程可能將手性色譜柱管沾污或損壞,使用前應將色譜柱進行試漏與清洗。
試漏的操作方法很簡單,只要將柱管全部浸入水中,將其出口填死,入口通入氮氣,在高于使用的操作壓力下,以壁管沒有氣泡冒出為合格。
清洗的方法,因柱管的材料不同而異。
(1)玻璃柱管可注入清洗液浸泡兩次(必要時使用溫熱的清洗液,效果更好),然后用子來水沖至中性,再用蒸餾水清洗。清潔的玻璃管內(nèi)壁不應掛有水珠,否則還要用溫熱的清洗液洗滌,洗后用自來水沖至中性,再用蒸餾水清洗,烘干后備用。
(2)對于不銹鋼柱管,可用5——10%的熱堿(NaOH或KOH)水溶液抽洗4——5次,以除去壁內(nèi)的油污,然后用自來水沖洗至中性,再用蒸餾水清洗,烘干后備用。
(3)對于銅柱管,可采用10%的鹽酸浸泡,并用水泵抽洗,直至抽洗液中無金屬銅銹或其他懸浮雜質(zhì)為止,然后用自來水沖至中性,再用蒸餾水清洗,烘干后備用。
(4)對于已經(jīng)用過的色譜柱,需要重換其固定相時,柱管也應當用相應的溶劑(如乙醇、熱堿液)依次洗滌,自來水沖至中性,然后用蒸餾水清洗,以除去柱管中的載體粉末及粘附在管壁上的固定液膜,烘干后備用。